【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：大鼠雌二醇（E2）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）

英文名稱(chēng)：Rat Estradiol（E2）ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

96人份/盒

【預(yù)期用途】

僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中大鼠雌二醇（E2）的濃度。

【檢驗(yàn)原理】

采用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)血清中雌二醇含量。首先用羊抗兔包被微孔板，制成固相二抗，然后加入待測(cè)血清、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記雌二醇以及抗雌二醇抗體，使之形成包被二抗-抗雌二醇抗體-雌二醇（HRP）復(fù)合物，標(biāo)記雌二醇的結(jié)合量與血清中的雌二醇量成反比。經(jīng)顯色后在酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值(OD值)，通過(guò)計(jì)算機(jī)或作圖擬合濃度－吸光度曲線，反算出待測(cè)血清中雌二醇含量。

【檢驗(yàn)方法】

操作程序

1. 將各種試劑移至室溫平衡1小時(shí)，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋?zhuān)靹蚝髠溆谩?/span>

2. 將預(yù)包被板從密封袋中取出，設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，不加任何液體；每個(gè)校準(zhǔn)品依次各設(shè)兩3. 孔，每孔加入相應(yīng)校準(zhǔn)品50μl；其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加質(zhì)控品或待測(cè)血清50μl。

4. 每孔加入酶標(biāo)抗原50μl（空白對(duì)照孔除外），再按同樣的順序每孔加入抗體50μl，充分混勻，貼上封板膜，置37℃溫育1小時(shí)。

5. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復(fù)3次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。

6. 每孔加顯色劑A液50μl，顯色劑B液50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。

7.用酶標(biāo)儀讀數(shù)，單波長(zhǎng)酶標(biāo)儀需先用空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，然后測(cè)定各孔吸光值。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1、外觀和物理檢查：液體組分應(yīng)澄清，無(wú)沉淀或絮狀物；所有組分應(yīng)無(wú)包裝破損。各組分裝量不少于表1中要求。

2、準(zhǔn)確性：在大鼠血清中添加高、中、低三個(gè)濃度的雌二醇制成樣品，以試劑盒校準(zhǔn)品進(jìn)行分析測(cè)定，用百分結(jié)合率對(duì)數(shù)（logit-ln）擬合，要求回收率在85.0%～115.0%之間。

3、線性：用Logit-ln數(shù)學(xué)模型擬合，在40~1000pg/ml范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)（r）的絕對(duì)值應(yīng)不低于0.9900。

4、精密度：

4.1批內(nèi)精密度（CV%）應(yīng)不高于15.0%；

4.2批間精密度（CV%）應(yīng)不高于15.0%。

5、最低檢出限：試劑盒最低檢出限應(yīng)不大于10 pg/ml。

6、質(zhì)控血清測(cè)定值：每次檢測(cè)結(jié)果均應(yīng)在允許范圍之內(nèi)。

7、穩(wěn)定性

2℃-8℃保存，有效期6個(gè)月。

8、檢測(cè)范圍

10pg/mL-1400pg/ml

【注意事項(xiàng)】

生物安全

1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進(jìn)行處置。

2、試劑盒的液體組分中，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng)，避免吸入煙霧與皮膚接觸。

3、底物液對(duì)皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。戴上防護(hù)手套，實(shí)驗(yàn)完成后徹底洗手。