【貨號(hào)】YKE50004

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：羊口蹄疫病毒 O 型抗體定性檢測(cè)試劑盒（ELISA）

英文名稱：Test Kit for Antibodies to Sheep Foot and Mouth Disease Virus O ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

96 人份/盒

【預(yù)期用途】

僅供科研使用，口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，F(xiàn)MDV）引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑。

本試劑用于檢測(cè)牛血清中口蹄疫病毒 O 型抗體，可用于口蹄疫病毒 O 型疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒系由預(yù)包被口蹄疫病毒 O 型 VP1 抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成， 應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)羊血清、血漿樣本中羊口蹄疫病毒 O 型抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有羊口蹄疫病毒 O 型抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加 TMB 底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有口蹄疫病毒O型抗體。

【檢驗(yàn)方法】

1. 使用前將試劑盒置室溫 30 分鐘，恢復(fù)至室溫。

2. 取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照 1 孔、陰性/陽性對(duì)照各 2 孔，未用的板條盡快密封，

2～8℃保存。

1. 空白對(duì)照孔加樣品稀釋液 100μl；陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰、陽性對(duì)照 100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品 100μl。

2. 混勻，置 37℃反應(yīng) 30 分鐘。

3. 扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，重復(fù)洗滌 5 次，拍干。

4. 每孔加酶標(biāo)記物 100μl（空白孔除外）。置 37℃反應(yīng) 30 分鐘。

5. 洗滌，同步驟 5。

6. 每孔依次加底物液 A、底物液 B 各 50μl，混勻，37℃避光反應(yīng) 10 分鐘。

7. 每孔加終止液 50μl，混勻，于 450nm(可用 630nm 作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A 值），無參比波長(zhǎng)用空白孔調(diào)零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值)。

【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對(duì)照≤0.15，陽性對(duì)照≥0.6。